E,8、懸浮微生物的檢測(cè)E 8、1,懸浮微生物的采樣裝置有以下兩類.1,采用無(wú)源采樣裝置.如培養(yǎng)皿,2 采用有源采樣裝置。如撞擊采樣器、離心采樣器.過(guò)濾采樣器。E,8,2,空氣潔凈環(huán)境中懸浮微生物的靜態(tài)或空態(tài)檢測(cè)前 應(yīng)對(duì)各類表面進(jìn)行擦拭消毒 但不得對(duì)室內(nèi)空氣進(jìn)行熏蒸,噴灑之類的消毒,動(dòng)態(tài)檢測(cè)均不得對(duì)表面和空氣進(jìn)行消毒、E.8,3,沉降菌檢測(cè)應(yīng)符合下列要求.1,使用直徑90mm、Φ90,的培養(yǎng)皿采樣,當(dāng)采用其他直徑培養(yǎng)皿時(shí)、應(yīng)使其總面積和Φ90皿總面積相當(dāng),2,培養(yǎng)皿中灌注胰蛋白酶大豆瓊脂培養(yǎng)基,必須留樣作陰性對(duì)照 3、培養(yǎng)皿表面應(yīng)經(jīng)適當(dāng)消毒清潔處理后,布置在有代表性的地點(diǎn)和氣流擾動(dòng)極小的地點(diǎn) 在亂流潔凈室內(nèi)培養(yǎng)皿不應(yīng)布置在送風(fēng)口正下方,4,當(dāng)用戶沒(méi)有特定要求時(shí),培養(yǎng)皿應(yīng)布置在地面及其以上0 8m之內(nèi)的任意高度 5。每一間潔凈室或每一個(gè)控制區(qū)應(yīng)設(shè)1個(gè)陰性對(duì)照皿,6。動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)時(shí)也可協(xié)商布點(diǎn)位置和高度,7.培養(yǎng)皿數(shù)應(yīng)不少于微粒計(jì)數(shù)濃度的測(cè)點(diǎn)數(shù),如工藝無(wú)特殊要求應(yīng)大于等于表E,8 3中的最少培養(yǎng)皿數(shù),另外各加1個(gè)對(duì)照皿 8.當(dāng)延長(zhǎng)沉降時(shí)間時(shí).可按比例減少最少培養(yǎng)皿數(shù).為防止脫水,最長(zhǎng)沉降時(shí)間不宜超過(guò)1h、當(dāng)所需沉降時(shí)間超過(guò)1h??芍丿B多皿連續(xù)采樣,除非經(jīng)過(guò)驗(yàn)證,證明更長(zhǎng)的沉降時(shí)間可以基本按比例增加菌落數(shù)、9,培養(yǎng)皿應(yīng)從內(nèi)向外布置 從外向內(nèi)收皿,10。每布置完1個(gè)皿.皿蓋只允許斜放在皿邊上。對(duì)照皿蓋挪開即蓋上,11。布皿前和收皿后.均應(yīng)用雙層包裝保護(hù)培養(yǎng)皿,以防污染,12.收皿后皿應(yīng)倒置擺放 并應(yīng)及時(shí)放入培養(yǎng)箱培養(yǎng).在培養(yǎng)箱外時(shí)間不宜超過(guò)2h 如無(wú)專業(yè)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,對(duì)于檢測(cè)細(xì)菌總數(shù).培養(yǎng)溫度采用。35。37,培養(yǎng)時(shí)間為、24,48,h,對(duì)于檢測(cè)真菌。培養(yǎng)溫度.27、29。培養(yǎng)時(shí)間3d、13.布皿和收皿的檢測(cè)人員必須穿無(wú)菌服.但不得穿大褂,頭 手均不得裸露,褲管應(yīng)塞在襪套內(nèi) 并不得穿拖鞋 14,對(duì)培養(yǎng)后的皿上菌落計(jì)數(shù)時(shí)。應(yīng)采用5、10倍放大鏡查看。若有2個(gè)或更多的菌落重疊??煞直鏁r(shí)則以2個(gè)或多個(gè)菌落計(jì)數(shù)、15.當(dāng)單皿菌落數(shù)太大受到質(zhì)疑時(shí),可按以下原則之一進(jìn)行處理 1。作為壞點(diǎn)剔除.2,重測(cè)、如結(jié)果仍大.以兩次平均值為準(zhǔn)。如結(jié)果很小,可再重測(cè)。3 重測(cè)該處微粒濃度,參考此結(jié)果作出判斷、所有上述處理方法均應(yīng)記錄在案 16.每皿平均菌落數(shù)取到小數(shù)點(diǎn)后1位,17 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)時(shí)每點(diǎn)疊放多個(gè)平皿或采用可自動(dòng)切換的儀器.每點(diǎn)應(yīng)采滿4h以上,每皿可采30min.當(dāng)只放1個(gè)皿時(shí),可少于4h 但不可少于1h,E、8.4.浮游菌采樣應(yīng)符合下列要求 1。使用單級(jí)或多級(jí)撞擊式采樣器,離心采樣器或過(guò)濾采樣器,采樣必須按所用儀器說(shuō)明書的步驟進(jìn)行 特別要注意檢測(cè)之前對(duì)儀器消毒火菌。并對(duì)培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條做陰性對(duì)照 2、采樣點(diǎn)數(shù)應(yīng)不少于微粒計(jì)數(shù)濃度測(cè)點(diǎn)數(shù).3.采樣點(diǎn)應(yīng)在離地0 8m高平面上均勻布置,或經(jīng)委托方.用戶,與檢測(cè)方協(xié)商確定,亂流潔凈室內(nèi)不得在送風(fēng)口正下方布點(diǎn),靜態(tài)或空態(tài)檢測(cè)前對(duì)室內(nèi)各種表面應(yīng)作擦拭消毒.4、每點(diǎn)采樣1次 如工藝無(wú)特殊要求,每次采樣量應(yīng)大于等于表E。8,4推薦的浮游菌最小采樣量,每次采樣時(shí)間不宜超過(guò)15min。不應(yīng)超過(guò)30min、當(dāng)潔凈度很高、或預(yù)期含菌濃度可能很低時(shí),采樣量應(yīng)大于最小采樣量很多,以滿足減少計(jì)數(shù)誤差的要求,5.采樣器應(yīng)用支架固定.采樣時(shí)檢測(cè)人員應(yīng)退出.手持離心式采樣器除外 檢測(cè)人員的穿戴同本附錄E.8、3條第15款,必須手持采樣器時(shí)、應(yīng)將手臂伸直、站于下風(fēng)向。6、采樣后宜在2h之內(nèi)將采樣器中的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基條送入培養(yǎng)箱中培養(yǎng),7 每點(diǎn)平均值取到小數(shù)點(diǎn)后1位。8,動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)的測(cè)點(diǎn)位置,數(shù)量和高度由工藝并經(jīng)協(xié)商確定、每間潔凈室或每一個(gè)獨(dú)立受控環(huán)境中各點(diǎn)總采樣量 不分級(jí)別.均應(yīng)大于1m3.每點(diǎn)可用多臺(tái)采樣器.9。單點(diǎn)菌落數(shù)太大時(shí).應(yīng)按附錄E、8。3條第15款的原則處理。E 8、5。表面染菌密度檢測(cè)應(yīng)符合下列要求.1。對(duì)于潔凈室內(nèi)圍護(hù)結(jié)構(gòu)。設(shè)備等表面的微生物采樣 應(yīng)采用無(wú)菌棉拭子擦抹法,當(dāng)表面很大 硬且平時(shí) 也可采用接觸皿法,2,用規(guī)格板標(biāo)定出面積為25cm2的區(qū)塊,對(duì)于圍護(hù)結(jié)構(gòu)、每面結(jié)構(gòu)不少于4塊、對(duì)于設(shè)備.每件不少于2塊、取樣地點(diǎn)均協(xié)商確定,3。將無(wú)菌棉拭于含10mL稀釋液試管中浸濕。于管壁上擠干后,對(duì)一區(qū)塊擦抹采樣、橫豎往返8次,每一區(qū)塊使用1根無(wú)菌棉拭,采樣后 以無(wú)菌操作方式將棉拭采樣端剪入原稀釋液試管中 經(jīng)電動(dòng)混勻器震蕩20s或在手掌振打200次.4.取含菌液體1、0mL,以瓊脂灌注法接種平皿 每個(gè)樣本接種2個(gè)平皿、于、35。37 培養(yǎng)箱中培養(yǎng).24.48,h后計(jì)數(shù),5,必須將本次檢測(cè)所用的稀釋液。棉拭子.培養(yǎng)基等留樣作陰性比照。6,具體事項(xiàng)遵照衛(wèi)生部、消毒技術(shù)規(guī)范、執(zhí)行、7 對(duì)于適用接觸皿采樣的表面 以無(wú)菌操作方式,先將培養(yǎng)基注入硬質(zhì)或軟質(zhì)Φ55平皿,使培養(yǎng)基表面高出培養(yǎng)皿周邊,測(cè)試時(shí).將培養(yǎng)皿倒過(guò)來(lái) 使培養(yǎng)基表面均勻牢固地按壓住整個(gè)區(qū)域5s 不得有環(huán)形或線性的運(yùn)動(dòng)。8,對(duì)于圍護(hù)結(jié)構(gòu)。每面結(jié)構(gòu)應(yīng)用不少于4個(gè)培養(yǎng)皿按壓.對(duì)于設(shè)備,每件用不少于2個(gè)培養(yǎng)皿按壓.9。按壓取樣后的培養(yǎng)皿.應(yīng)在2h之內(nèi).于 35.37,培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24 48,h后計(jì)數(shù),10、菌數(shù)平均數(shù)取到小數(shù)點(diǎn)后1位,