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附錄B 規(guī)范性附錄、脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活試驗(yàn)B。1 試驗(yàn)原理,將規(guī)定感染滴度的脊髓灰質(zhì)炎病毒懸液以一定比例與酸性電解水混合。作用至規(guī)定的時(shí)間后加入中和劑、終止酸性電解水的滅活作用，接種細(xì)胞 進(jìn)行殘留病毒感染滴度測(cè)定，然后與陽(yáng)性對(duì)照組的病毒感染滴度進(jìn)行比較.以確定其對(duì)病毒的滅活效果.B。2。滅活試驗(yàn)方法。脊髓灰質(zhì)炎病毒，型疫苗株，懸液的制備按 消毒技術(shù)規(guī)范.2002年版 進(jìn)行.B,3,脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活試驗(yàn)操作步驟B。3,1,取脊髓灰質(zhì)炎病毒液0。05mL加到無(wú)菌試管中。再加入0，05mL有機(jī)干擾物、然后加入4，9mL酸性電解水，混勻 于20、水域中作用至規(guī)定時(shí)間 B、3。2 取0,1mL病毒與酸性電解水混合液 加入到含0，9mL中和劑的試管中.振打混合后 取樣按，消毒技術(shù)規(guī)范。2002年版.2、1、1，10。4所示方法檢測(cè)殘留脊髓灰質(zhì)炎病毒滴度，B,3、3。陽(yáng)性對(duì)照。用細(xì)胞維持液代替酸性電解水、其余步驟與試驗(yàn)組相同、B 3 4,陰性對(duì)照,用不含脊髓灰質(zhì)炎病毒的完全培養(yǎng)基作為陰性對(duì)照，以觀察培養(yǎng)基無(wú)污染 細(xì)胞是否生長(zhǎng)良好。B,3,5.試驗(yàn)重復(fù)3次.B，3.6,根據(jù)各組的平均病毒感染滴度.TCID50、分別計(jì)算其對(duì)病毒的滅活對(duì)數(shù)值、B，4,評(píng)價(jià)規(guī)定,對(duì)脊髓灰質(zhì)炎病毒.在3次試驗(yàn)中,陽(yáng)性對(duì)照組病毒對(duì)數(shù)值為5.7。滅活對(duì)數(shù)值，4、00。判為消毒合格。B。5、注意事項(xiàng)B、5，1,對(duì)有機(jī)干擾物的要求與A,2，5 2相同,B、5 2.在病毒滅活試驗(yàn)中、每次均應(yīng)設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，B。5 3。脊髓灰質(zhì)炎病毒滅活試驗(yàn)操作應(yīng)在生物安全。級(jí)以上實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行 避免造成操作人員實(shí)驗(yàn)室感染和對(duì)環(huán)境污染,B 5，4,操作人員應(yīng)具有基本的病毒學(xué)實(shí)驗(yàn)工作經(jīng)驗(yàn)、量使用移液器與無(wú)菌一次性吸頭。